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問答題
【簡答題】在重組DNA操作中為了提高連接效率常常將非互補(bǔ)的黏性末端修飾成平末端之后再進(jìn)行連接。請問將黏性末端變?yōu)槠蕉说姆椒ㄓ心男?/h4>
答案:
(1)5’—突出黏性末端的補(bǔ)平,一般選用大腸桿菌DNA聚合酶I的Klenow大片段聚合酶進(jìn)行填補(bǔ)...
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問答題
【簡答題】如何用PCR制備突變DNA分子?
答案:
可用PCR進(jìn)行定點(diǎn)突變,即在特定位點(diǎn)引入突變。該突變可以是堿基替代、插入或者缺失。為了在靶基因特定位點(diǎn)導(dǎo)入突變,在PCR...
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問答題
【簡答題】小量制備質(zhì)粒DNA,用質(zhì)粒中特定的酶切發(fā)現(xiàn)切割不動,試分析可能原因及克服方法?
答案:
最可能的原因:從細(xì)菌沉淀或從核酸沉淀中吸上清時注意不夠,帶了雜蛋白。其最根本的原因是因?yàn)榧?xì)菌的細(xì)胞壁成分或核內(nèi)某些蛋白質(zhì)...
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