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【簡答題】一個攜帶有氨芐和卡那霉素抗性基因的質(zhì)粒被僅在卡那霉素基因中有識別位點的EcoRI消化。消化物與酵母 DNA 連接后轉(zhuǎn)化對兩種抗生素都敏感的 E.coli 菌株。 (1)利用哪一種抗生素抗性選擇接受了質(zhì)粒的細(xì)胞? (2)怎樣區(qū)分接受了插入酵母 DNA的質(zhì)粒的克???
答案:
(1)選擇Amp
r
的轉(zhuǎn)化子;
(2)所需的克隆是Amp
r
和Kan
r
。任何能夠抗這兩種藥物的克隆都是自連的非重組質(zhì)粒。
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(2)DNA聚合酶Ⅲ的 5’3’外切核酸酶進(jìn)行切割;
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